Détection in vitro de biomolécules
La détection sensible in vitro de biomolécules est essentielle dans de nombreux contextes, notamment pour les applications médicales, que ce soit pour l'identification efficace de pathogènes ou la surveillance de biomarqueurs. La possibilité d'atteindre une sensibilité élevée avec des dispositifs simples est donc un objectif important pour améliorer la caractérisation des échantillons environnementaux ou l'efficacité du diagnostic et, par conséquent, la prophylaxie ou les soins aux patients. À cette fin, nous développons l'utilisation de nanoparticules photoluminescentes à base de lanthanide en tant que rapporteurs biologiques in vitro ultrasensibles. Ces nano-objects, synthetisés au Laboratoire de Physique de la Matière Condensée (Ecole Polytechnique) ont des propriétés optiques reamarquables, avec notamment une brillance et une photstabilité exceptionnelles. Nous mettons notamment au point des protocoles et l'instrumentation pour la détection multiplexée rapide à l'aide de tests chromatographiques à based de membranes de nitrocellulose (or Lateral Flow Assays ). A l'aide de ces développpements technologiques, nous réalisons la détection quantiatative de multiple pathogènes à très haute sensibilité (picomolaire) pour des test rapides (Figure).
Nous développons des technologies pour la détection ultra-sensible - à des concentrations femto- ou attomolar range) de protéines et d'acides nucléiques (ADN et ARN) dans des échantillons biologiques, comme alternatives aux méthodes usuelles et aux plus sensibles récemment développées (ELISA, ECLIA, Simoa, (q)PCR ,...), en utilisant respectivement des méthodes d'immunomarqage et d'hybridization . Avec le développement d'instrumentation ad hoc, nous réalisons la détection de cibles multiples dans des environnements variés (tampons acqueux, plasma, sérum, culture cellulaire), qui consistuerons la base de futurs tests de diagnostic in vitro.
Droite: Plan du système de détection ultra-sensible, basés sur l'excitation UV et la collection résolue en temps. Gauche: Détection de l'insuline dans du tampon aqeux et comparaison au test ELISA de référence.
References
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